• 南阳医学高等专科学校第一附属医院普胸外科二病区(河南南阳 473000);
导出 下载 收藏 扫码 引用

目的 探讨沉默泛素结合酶 E2T(UBE2T)基因表达对 A549 细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等生物学行为的影响。方法 体外培养 A549 细胞,分别构建三组 shRNA-UBE2T 质粒载体(UBE2T-shRNA1 组、UBE2T-shRNA2 组和 UBE2T-shRNA3 组)以及 shRNA-NC(shRNA-NC 组),并以脂质体转染法转染 A549 细胞,以转染空载体的细胞作为对照组。采用逆转录–聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染效率;使用克隆形成实验、流式细胞术、Transwell 实验、划痕实验检测沉默 UBE2T 表达对 A549 细胞增殖、凋亡、侵袭以及迁移等生物学行为的影响;使用蛋白印迹(Western blot)检测 A549 细胞增殖、凋亡相关蛋白表达及 PI3K/AKT 信号通路蛋白表达。结果 转染后,UBE2T-shRNA1 组、UBE2T-shRNA2 组和 UBE2T-shRNA 三组 UBE2T mRNA 表达水平明显下调(均 P<0.05),且以 UBE2T-shRNA3 组下调最多(P<0.05)。与对照组及 shRNA-NC 组比较,UBE2T-shRNA3 组克隆形成率、A549 细胞侵袭数、划痕愈合率,Ki67 蛋白表达、PCNA 蛋白表达及 p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT 比值均显著降低(均 P<0.05),A549 细胞凋亡率及 Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/Caspase-3 比值显著增加(均 P<0.05)。对照组与 shRNA-NC 组上述各指标比较,差异均无统计学意义(均 P>0.05)。结论 shRNA 干扰 UBE2T 构建稳定低表达 UBE2T 的 A549 细胞模型可靠,UBE2T 表达下调可以促进 A549 细胞凋亡,并抑制其增殖、侵袭和转移能力。其机制可能与抑制 PI3K/AKT 信号通路激活相关。

引用本文: 陈鸿运, 李晓明, 黄国胜, 杨金华, 乔飞. 沉默 UBE2T 基因表达对 A549 细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响. 中国呼吸与危重监护杂志, 2021, 20(8): 577-583. doi: 10.7507/1671-6205.202011058 复制

  • 上一篇

    白藜芦醇对海水淹溺性肺损伤大鼠的保护作用研究
  • 下一篇

    尼达尼布治疗放射性肺损伤一例并文献复习