• 1. 德阳市人民医院心胸外科(四川德阳 618000);
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  • 3. 德阳市人民医院病理科(四川德阳 618000);
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目的  探究干扰 RNA(shRNA)敲低非小细胞肺癌(NSCLC)A549 细胞雌激素受体 α(ERα)基因后对 A549 细胞生物学活性及裸鼠肿瘤生长的影响。方法  采用 shRNA 敲低 A549 细胞中的 ERα 基因,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测敲低后的基因表达与蛋白表达,克隆形成实验检测细胞的增殖能力,RT-PCR 检测相关增殖蛋白 Ki-67 和 PCNA 的表达,流式细胞检测细胞凋亡率;Transwell 实验检测细胞的侵袭能力,Western blot 检测上皮型钙黏蛋白(E-cad)和神经型钙黏蛋白(N-cad)的表达。对照组和转染 ERα-shRNA1 的 A549 细胞分别注射到裸鼠皮下,构建移植瘤,免疫组织化学检测肿瘤组织中 Ki-67 与 N-cad 的表达。结果  与对照组相比,转染 ERα-shRNA1 和 ERα-shRNA2 后,ERα 的 mRNA 和蛋白表达量均明显下调(均 P<0.05),采用干扰效率高的 shRNA1 进行后续实验。A549 细胞转染 ERα-shRNA1 后,集落形成率较对照组显著下调(P<0.05),细胞凋亡比率明显升高(P<0.05),Ki-67 和 PCNA 的表达显著下调(P<0.05),侵袭细胞数目明显减少,E-cad 表达升高,N-cad 表达降低(均 P<0.05)。裸鼠成瘤实验结果表明干扰 ERα 的表达可显著抑制肿瘤的生长(P<0.05),下调 Ki-67 与 N-cad 的阳性细胞比率(均 P<0.05)。结论  敲低 ERα 抑制了 A549 细胞的生长、运动能力及裸鼠移植瘤的发生和发展。

引用本文: 陈沛锐, 吕静, 曾春芳, 何小艳, 刁明强. 敲低雌激素受体 α 基因抑制 A549 细胞的增殖、迁移及裸鼠移植瘤的形成. 中国呼吸与危重监护杂志, 2021, 20(9): 649-655. doi: 10.7507/1671-6205.202006060 复制

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